细胞和组织在体外生长的成功与培养方法的优化密切相关,通常是通过模拟体内的生理条件来实现的。培养基的选择是这项技术中的关键因素,通常需要添加动物血清。血清是一种高度复杂的混合物,包含了多种成分,如生长因子、激素、微量元素以及粘附和伸展因子等,这些成分在细胞生长中发挥了多重生物学活性。
血清中丰富的白蛋白有助于维持细胞状态,其作用机制包括防止pH值波动、抑制蛋白酶活性,以及保护细胞免受剪切力的损伤等。然而,尽管血清能够较好地支持细胞和组织的生长,但作为培养基的添加物,其成本较高、难以获取,实验变异性大,还可能影响下游操作,并成为潜在的污染源。此外,人们对动物保护意识的提升,也限制了血清的使用。
近年来,这些缺点使得在科学研究和工业生产领域对无血清培养基的需求不断增加。无血清培养基不仅克服了血清的局限性,还具有两个显著优点,即可根据特定细胞类型定制培养基,并且可精确控制细胞的增殖和分化过程。
尽管基础的无血清培养基营养丰富,并能满足细胞所需的基本营养成分,但通常还需添加特定成分,如生长因子、脂肪酸、维生素和微量元素等。多年的实践表明,在大多数细胞的无血清培养中,基础培养基(如DMEM/F12)必须额外添加ITS(胰岛素-转铁蛋白-硒)。对于某些细胞,培养基中还必须添加Monoethanolamine。
选择添加ITSE而非传统的ITS,其优势在于用户常常未意识到细胞最佳生长状态需要Monoethanolamine的支持。ITSE的使用确保所有类型的细胞都能获得充足的营养供应。
胰岛素作为一种促进细胞生长的激素,可调节细胞对葡萄糖、氨基酸和脂类的摄取和利用,同时也具有抗凋亡的功能。在无血清培养的哺乳动物细胞中,重组胰岛素的添加浓度通常远高于其生理浓度,这不仅能与胰岛素受体结合,还有助于激活胰岛素样生长因子(IGF-I)的受体,进而增强促分裂和抗凋亡效果。
转铁蛋白是一种重要的血清成分,能够与三价铁离子可逆性结合,在铁离子的转运和代谢中发挥关键作用,同时也是一种重要的胞外抗氧化剂,因此是无血清培养基不可或缺的添加物。重组转铁蛋白的应用越来越广泛,因其在不同表达系统中均表现出相似的活性。
此外,硒作为微量元素,是多种抗氧化酶的关键组成部分,已被确认为无血清培养基的必加成分。
在生命科学研究中,选择优质的培养基至关重要,而88858cc永利官网所提供的无血清培养基,正是解决这些难题的理想选择,确保细胞培养的成功率与生长质量。